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病理油红O染色实验技术服务介绍
油红O对脂滴的染色机制一般认为是物理学上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂质染色,即油红O先溶于60%异丙醇中,然后切片浸入油红O染液中时,油红O在组织脂质的溶解度较60%异丙醇中的溶解度高,所以在染色时油红O从60%异丙醇中转移入脂质中使脂滴显示红色。
细胞周围在镜下呈现空泡时,究竟是水样变性、糖原,还是被溶解的脂肪?就需要用脂质染色来帮助鉴别诊断,如脂肪瘤或脂肪肉瘤,脂肪染色呈阳性。肾的透明细胞癌,在癌细胞胞质透亮,但脂肪染色为阴性。肾上腺皮脂腺瘤质染色也为阳性。动脉粥样硬化时,可见内皮细胞内有脂质沉着。脂滴显示红色,细胞核呈浅蓝色。
服务流程
油红O染色步骤
固定:将冰冻切片复温干燥10min;细胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,5min/次。
染色:入油红O工作液孵育10-15min;细胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,5min/次,入油红O工作液37°染色1-2h。
分化:75%酒精分化2s,水洗1min。
复染细胞核:Harris苏木素复染1-2min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
封片:用纸巾吸去周边水分,甘油明胶封片。
染色结果:脂滴呈橘红色至鲜红色,细胞核蓝色。
客户需知
由于脂肪易溶于有机溶剂,所以一般用冰冻切片染色来显示。
作脂肪染色的冰冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
苏木素复染时间不能过长。
染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。
整个操作过程中注意动作宜轻柔,不宜动作太大,以免脂肪丢失或移位。
甘油明胶常温下为凝固状,用前30min放入60°烘箱或入60°温水促其成液状,其封片后易产生气泡,所以要趁甘油明胶从烘箱中拿出来后尽快封片。
封片后如有气泡不能按压改玻片也不宜强行扯下盖玻片,玻片可入60-70°温水中,让盖玻片自行脱落,然后重新封片,以防脂肪移位。
实验周期
本公司常规实验周期为15个工作日。(不含送货时间)
收费标准
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